פיתוח חיסון תת יחידה (subunit vaccine) לנגיף ראו Genotypic Cluster 5 בעופות
מאת: יגאל פרנושי ,אמירה אלטורי , אבישי לובלין החטיבה למחלות עופות, המכון הווטרינרי ע"ש קמרון, בית דגן, ישראל
צילום המחשה: Martin Lopez / PEXELS
נגיפי ראו (Reoviruses) מעורבים במגוון רב של מחלות בעופות אשר החשובה ביותר היא דלקת פרקים נגיפית בתרנגולות viral arthritis)), מחלה המופיעה בעיקר בתרנגולות לבשר ובה נראית נפיחות של אחד או שני מפרקי העקב (hock joints), וכוללת צליעה חריפה. תסמונת צומת הגידים בה יש קרע של אחד מגידי שריר הגסטרוקנמיוס (gastrocnemius) גם היא נגרמת כתוצאה מהדבקה בנגיף ראו בעופות צעירים, מתגלה בדרך כלל קרוב לשחיטה ופוגעת בשחיטה הכשרה בישראל בגלל פסילת עופות עם קרע באחד הגידים. הנזק מתסמונת זו בשנים 2015-2016 הגיע לכ-200 מיליון ₪ בשנה. בשנים האחרונות יש ירידה במקרי המחלה בשדה כנראה הודות להכנסת השימוש בחיסון חי בפרגיות כבדות.
פיתוח חיסון בטוח ויעיל כנגד נגיף ראו בעופות הוא אתגר משמעותי. כיום נמצאים בשוק תרכיבים חיים ומומתים מזנים שונים שחלקם הגדול לא נותנים מענה לבעיה בשטח. הנגיף שבשימוש בחלק מהתרכיבים שייך ל- Genotypic Cluster (GC1) (כמו S-1133) שממנו נראו רק מקרים בודדים בשנים האחרונות. רוב נגיפי ראו בעופות בשנים האחרונות שייכים ל-GC5.
במחקר הנוכחי נבחר בידוד מתוך הקבוצה השלטת והגנום שלו רוצף במלואו. לפי הרצף המלא של מקטעים Sigma C ו-Sigma B של הנגיף הנבחר תוכננו פלסמידים. מקטע sigma C ו-sigma B גורמים ליצירת נוגדנים מנטרלים ספציפיים לקבוצה ולסוג בהתאמה (group and type specific neutralizing antibodies). המקטעים שובטו בפלסמיד (pET28a), הועברו לחיידק E.coli וביטוי חלבונים התבצע בהמשך באמצעות IPTG. החלבונים המיוצרים עברו ניקוי ובהמשך הוזרקו תת עורית לאפרוחי SPF בשתי מנות, בגיל שבועיים וארבעה שבועות. שבועיים לאחר החיסון השני האפרוחים הוקעו בנגיף אלים בהזרקה בכף רגל שמאל כאשר ברגל ימין הוזרק PBS כביקורת. במקביל קבוצה אחרת של אפרוחים קיבלו פעמיים חיסון מומת ועברו הוקעה בדומה לקבוצות חיסון התת יחידה.
שלושה ימים לאחר ההוקעה האפרוחים הומתו ובוצעה השוואה משקלית בין הרגל המוזרקת בנגיף וזו המוזרקת ב-PBS (ביקורת). ניתוח תוצאות הניסוי הראה הגנה יחסית של 70% בקבוצה שקיבלה חיסון מומת לעומת 62% בקבוצה שקיבלה פעמיים תרכיב תת יחידה עם מקטע sigma C. אחוז ההגנה בקבוצה שקיבלה הרכב של מקטעים (sigma B, sigma C) היה נמוך יותר (31%) כנראה בגלל ריכוז נמוך של חלבונים. כרגע מתבצע ניסוי נוסף עם ריכוזים גבוהים יותר של החלבונים כדי להגיע לתוצאות טובות יותר. ניסוי זה מוכיח שפתוח תרכיב חיסון תת יחידה יעיל כנגד נגיף ראו אכן אפשרי.
